Gen rezistence na karbapenem (KPC/NDM/OXA 48/OXA 23/VIM/IMP)
Jméno výrobku
HWTS-OT045 Detekční souprava genu rezistence na karbapenem (KPC/NDM/OXA 48/OXA 23/VIM/IMP) (Fluorescence PCR)
Epidemiologie
Karbapenemová antibiotika jsou atypická β-laktamová antibiotika s nejširším antibakteriálním spektrem a nejsilnější antibakteriální aktivitou.Díky své stabilitě vůči β-laktamáze a nízké toxicitě se stal jedním z nejdůležitějších antibakteriálních léků pro léčbu závažných bakteriálních infekcí.Karbapenemy jsou vysoce stabilní vůči plasmidem zprostředkovaným β-laktamázam s rozšířeným spektrem (ESBL), chromozomům a plasmidem zprostředkovaným cefalosporinázám (enzymy AmpC).
Kanál
| PCR-Mix 1 | PCR-Mix 2 | |
| FAM | IMP | VIM |
| VIC/HEX | Interní kontrola | Interní kontrola |
| CY5 | NDM | KPC |
| ROX | OXA48
| OXA23 |
Technické parametry
| Úložný prostor | ≤-18℃ |
| Skladovatelnost | 12 měsíců |
| Typ vzorku | Sputum, čisté kolonie, rektální výtěr |
| Ct | ≤36 |
| CV | ≤ 5,0 % |
| LoD | 103CFU/ml |
| Specifičnost | a) Souprava detekuje standardizované firemní negativní reference a výsledky splňují požadavky odpovídajících referencí. b) Výsledky testu zkřížené reaktivity ukazují, že tato souprava nemá žádnou zkříženou reakci s jinými respiračními patogeny, jako jsou Klebsiella pneumoniae, Acinetobacter baumannii, Pseudomonas aeruginosa, Streptococcus pneumoniae, Neisseria meningitidis, Staphylococcus aureus, Klebsiella oxyobacterustoca, Haemcinet junii, Acinetobacter haemolyticus, Legionella pneumophila, Escherichia coli, Pseudomonas fluorescens, Candida albicans, Chlamydia pneumoniae, respirační adenovirus, Enterococcus nebo vzorky obsahující jiné geny rezistentní vůči lékům CTX, mecA, SME, SHV, TEM atd. c) Antiinterference: Mucin, Minocyklin, Gentamicin, Clindamycin, Imipenem, Cefoperazon, Meropenem, Ciprofloxacin hydrochlorid, Levofloxacin, Kyselina klavulanová, Roxithromycin jsou vybrány pro interferenční test a výsledky ukazují, že výše uvedené interferující látky nemají žádnou interferující reakci. k detekci genů rezistence na karbapenem KPC, NDM, OXA48, OXA23, VIM a IMP. |
| Použitelné nástroje | Applied Biosystems 7500 Real-Time PCR Systems QuantStudio®5 systémy PCR v reálném čase SLAN-96P Real-Time PCR Systems (Hongshi Medical Technology Co., Ltd.) LightCycler®480 Real-Time PCR systém LineGene 9600 Plus Real-Time PCR detekční systém (FQD-96A,Chang-čouTechnologie Bioer) MA-6000 kvantitativní tepelný cyklovač v reálném čase (Suzhou Molarray Co., Ltd.) BioRad CFX96 Real-Time PCR systém BioRad CFX Opus 96 systém PCR v reálném čase |
Pracovní postup
Možnost 1.
Doporučené extrakční činidlo: Macro & Micro-Test General DNA/RNA Kit (HWTS-3019-50, HWTS-3019-32, HWTS-3019-48, HWTS-3019-96) (který lze použít s automatickým extraktorem nukleových kyselin Macro & Micro-Test (HWTS-3006C, HWTS-3006B)) od Jiangsu Macro & Micro-Test Med-Tech Co., Ltd.. Přidejte 200 μl normálního fyziologického roztoku do sraženina talu.Následné kroky by se měly řídit pokyny pro extrakci a doporučený eluční objem je100μL.
Možnost 2.
Doporučené extrakční činidlo: Nucleic Acid Extraction or Purification Reagent (YDP302) od Tiangen Biotech (Beijing) Co., Ltd. Extrakce by měla být zahájena v přísném souladu s krokem 2 návodu k použití (přidejte 200 μl pufru GA do sraženiny stélky a protřepávejte, dokud se stélka zcela nezavěsí).K eluci použijte vodu bez RNázy/DNázy a doporučený eluční objem je 100 μl.
Možnost 3.
Doporučené extrakční činidlo: Macro & Micro-Test Sample Release Reagent.Vzorek sputa je třeba promýt přidáním 1 ml normálního fyziologického roztoku k výše uvedené sraženině stélky, centrifugovat při 13 000 ot./min. po dobu 5 minut a supernatant je zlikvidován (ponechejte si 10-20 ul supernatantu).Pro čisté kolonie a rektální výtěr přidejte 50 μl činidla pro uvolnění vzorku přímo do výše uvedené ošetřené sraženiny talu a následné kroky by měly být extrahovány podle návodu k použití.
