Mycobacterium tuberculosis rezistence na nukleovou kyselinu a rifampicin
Jméno výrobku
HWTS-RT074B-Mycobacterium Tuberculosis Nucleic Acid and Rifampicin Resistance Detection Kit (Křivka tání)
Osvědčení
CE
Epidemiologie
Mycobacterium tuberculosis, krátce jako Tubercle bacillus, TB, je patogenní bakterie, která způsobuje tuberkulózu.V současné době mezi běžně užívané léky 1. linie proti tuberkulóze patří isoniazid, rifampicin a hexambutol aj. Mezi léky 2. linie proti tuberkulóze patří fluorochinolony, amikacin a kanamycin atd. Nově vyvíjené léky jsou linezolid, bedachilin a delamani atd. V důsledku nesprávného použití antituberkulózních léků a vlastností struktury buněčné stěny mycobacterium tuberculosis si však mycobacterium tuberculosis vyvine lékovou rezistenci k antituberkulotikům, což přináší vážné problémy v prevenci a léčbě tuberkulózy.
Rifampicin je široce používán v léčbě pacientů s plicní tuberkulózou od konce 70. let 20. století a má významný účinek.Jednalo se o první volbu ke zkrácení chemoterapie pacientů s plicní tuberkulózou.Rezistence na rifampicin je způsobena především mutací genu rpoB.Přestože stále přicházejí nová antituberkulotika a klinická účinnost pacientů s plicní tuberkulózou se také neustále zlepšuje, stále existuje relativní nedostatek antituberkulotik a fenomén iracionálního užívání drog v klinické praxi je poměrně vysoký.Je zřejmé, že Mycobacterium tuberculosis u pacientů s plicní tuberkulózou nelze včas zcela usmrtit, což nakonec vede k různému stupni lékové rezistence v těle pacienta, prodlužuje průběh onemocnění a zvyšuje riziko úmrtí pacienta.
Kanál
Kanál | Kanály a fluorofory | Reakční pufr A | Reakční pufr B | Reakční pufr C |
FAM kanál | Reportér: FAM, Quencher: Žádný | rpoB 507-514 | rpoB 513-520 | 38KD a IS6110 |
Kanál CY5 | Reportér: CY5, Quencher: Žádný | rpoB 520-527 | rpoB 527-533 | / |
HEX (VIC) kanál | Reportér: HEX (VIC), Quencher: Žádný | Interní kontrola | Interní kontrola | Interní kontrola |
Technické parametry
Úložný prostor | ≤-18℃ Ve tmě |
Skladovatelnost | 12 měsíců |
Typ vzorku | Sputum |
CV | ≤ 5,0 % |
LoD | mycobacterium tuberculosis 50 bakterií/ml divoký typ rezistentní na rifampicin: 2x103bakterií/ml homozygotní mutant: 2x103bakterií/ml |
Specifičnost | Detekuje divoký typ mycobacterium tuberculosis a mutační místa jiných genů lékové rezistence, jako je katG 315G>C\A, InhA-15C>T, výsledky testu neukazují žádnou rezistenci k rifampicinu, což znamená, že nedochází ke zkřížené reaktivitě. |
Použitelné nástroje: | SLAN-96P Real-Time PCR systémy BioRad CFX96 Real-Time PCR systém Systém LightCycler480® Real-Time PCR |
Pracovní postup
Pokud používáte sadu Macro & Micro-Test General DNA/RNA Kit (HWTS-3019-50, HWTS-3019-32, HWTS-3019-48, HWTS-3019-96) (kterou lze použít s Macro & Micro-Test Automatic Extraktor nukleových kyselin (HWTS-3006C, HWTS-3006B)) nebo Macro & Micro-Test Viral DNA/RNA Column (HWTS-3022-50) od Jiangsu Macro & Micro-Test Med-Tech Co., Ltd. pro extrakci, přidejte 200 μl pozitivní kontroly, negativní kontroly a zpracovaného vzorku sputa, které mají být testovány v pořadí, a přidat 10 μl interní kontroly samostatně do pozitivní kontroly, negativní kontroly a zpracovaného vzorku sputa, který má být testován, a následující kroky by měly být přísně provedeny podle návodu k extrakci.Objem extrahovaného vzorku je 200 μl a doporučený eluční objem je 100 μl.