Rezistence Mycobacterium tuberculosis na nukleové kyseliny a rifampicin
Název produktu
Souprava HWTS-RT074B-Mycobacterium Tuberculosis pro detekci rezistence na nukleové kyseliny a rifampicin (křivka tání)
Osvědčení
CE
Epidemiologie
Mycobacterium tuberculosis, zkráceně tuberkulózní bacil, TB, je patogenní bakterie, která způsobuje tuberkulózu. V současné době mezi běžně používané léky první volby proti tuberkulóze patří isoniazid, rifampicin a hexambutol atd. Mezi léky druhé volby proti tuberkulóze patří fluorochinolony, amikacin a kanamycin atd. Nově vyvinuté léky jsou linezolid, bedachilin a delamani atd. Avšak kvůli nesprávnému užívání léků proti tuberkulóze a charakteristikám struktury buněčné stěny Mycobacterium tuberculosis si Mycobacterium tuberculosis vyvíjí rezistenci na léky proti tuberkulóze, což představuje vážné problémy v prevenci a léčbě tuberkulózy.
Rifampicin se široce používá v léčbě pacientů s plicní tuberkulózou od konce 70. let 20. století a má významný účinek. Je to lék první volby pro zkrácení chemoterapie pacientů s plicní tuberkulózou. Rezistence na rifampicin je způsobena především mutací genu rpoB. Přestože se neustále objevují nové léky proti tuberkulóze a klinická účinnost pacientů s plicní tuberkulózou se také neustále zlepšuje, stále existuje relativní nedostatek léků proti tuberkulóze a fenomén iracionálního užívání léků v klinické praxi je relativně vysoký. Je zřejmé, že Mycobacterium tuberculosis u pacientů s plicní tuberkulózou nemůže být včas zcela zničeno, což nakonec vede k různým stupňům rezistence na léky v těle pacienta, prodlužuje průběh onemocnění a zvyšuje riziko úmrtí pacienta.
Kanál
Kanál | Kanály a fluorofory | Reakční pufr A | Reakční pufr B | Reakční pufr C |
Kanál FAM | Reportér: FAM, Quencher: Žádný | rpoB 507-514 | rpoB 513-520 | 38KD a IS6110 |
Kanál CY5 | Reportér: CY5, Zhášeč: Žádný | rpoB 520-527 | rpoB 527-533 | / |
HEX (VIC) kanál | Reportér: HEX (VIC), Zhášeč: Žádný | Vnitřní kontrola | Vnitřní kontrola | Vnitřní kontrola |
Technické parametry
Skladování | ≤-18℃ Ve tmě |
Trvanlivost | 12 měsíců |
Typ vzorku | Sputum |
CV | ≤5,0 % |
Úroveň hádanky | Mycobacterium tuberculosis 50 bakterií/ml divoký typ rezistentní na rifampicin: 2x103bakterie/ml homozygotní mutant: 2x103bakterie/ml |
Specifičnost | Detekuje divoký typ Mycobacterium tuberculosis a mutační místa jiných genů rezistence na léky, jako je katG 315G>C\A, InhA-15C>T. Výsledky testu neprokazují žádnou rezistenci na rifampicin, což znamená, že nedochází ke zkřížené reaktivitě. |
Použitelné nástroje: | Systémy SLAN-96P pro PCR v reálném čase Systém pro real-time PCR BioRad CFX96 Systém pro real-time PCR LightCycler480® |
Pracovní postup
Pokud pro extrakci používáte sadu Macro & Micro-Test General DNA/RNA Kit (HWTS-3019-50, HWTS-3019-32, HWTS-3019-48, HWTS-3019-96) (kterou lze použít s automatickým extraktorem nukleových kyselin Macro & Micro-Test (HWTS-3006C, HWTS-3006B)) nebo kolonu Macro & Micro-Test Viral DNA/RNA Column (HWTS-3022-50) od společnosti Jiangsu Macro & Micro-Test Med-Tech Co., Ltd., přidejte postupně 200 μl testovaného vzorku pozitivní kontroly, negativní kontroly a zpracovaného vzorku sputa a 10 μl interní kontroly přidejte odděleně do testovaného vzorku pozitivní kontroly, negativní kontroly a zpracovaného vzorku sputa a následující kroky by měly být provedeny přesně podle pokynů pro extrakci. Objem extrahovaného vzorku je 200 μl a doporučený eluční objem je 100 μl.