Souprava pro detekci mutací KRAS 8 (fluorescenční PCR) - RUO
Název produktu
Souprava pro detekci mutací KRAS 8 (fluorescenční PCR) - RUO
Epidemiologie
Bodové mutace v genu KRAS byly nalezeny u řady typů lidských nádorů, přičemž míra mutací v nádorech dosahuje přibližně 17–25 %, u pacientů s rakovinou plic 15–30 % a u pacientů s kolorektálním karcinomem 20–50 %. Protože se protein P21 kódovaný genem K-ras nachází za signální dráhou EGFR, je po mutaci genu K-ras signální dráha vždy aktivována a není ovlivněna léky cílenými na EGFR směrem nahoru, což vede k kontinuální maligní proliferaci buněk. Mutace v genu K-ras obecně způsobují rezistenci vůči inhibitorům tyrozinkinázy EGFR u pacientů s rakovinou plic a rezistenci vůči protilátkám proti EGFR u pacientů s kolorektálním karcinomem [1, 2, 3]. V roce 2008 vydala Národní komplexní síť pro boj s rakovinou (NCCN) klinické pokyny pro kolorektální karcinom, které upozornily na to, že místa mutací, která způsobují aktivaci K-ras, se nacházejí hlavně v kodonech 12 a 13 exonu 2, a doporučily, aby všichni pacienti s pokročilým metastatickým kolorektálním karcinomem byli před léčbou testováni na mutaci K-ras[4]. Rychlá a přesná detekce genové mutace K-ras má proto velký význam v klinickém poradenství pro léčbu. Tato souprava používá DNA jako detekční vzorek k zajištění kvalitativního posouzení stavu mutace, což může lékařům pomoci při screeningu pacientů s kolorektálním karcinomem, karcinomem plic a dalšími nádory, kteří profitují z cílených léků. Výsledky testů soupravy slouží pouze pro klinickou referenci a neměly by být používány jako jediný základ pro individualizovanou léčbu pacientů. Lékaři by měli činit komplexní úsudek o výsledcích testů na základě faktorů, jako je stav pacienta, indikace léků, odpověď na léčbu a další ukazatele laboratorních testů.
Technické parametry
| Skladování | ≤-18℃ |
| Trvanlivost | 12 měsíců |
| Typ vzorku | patologické řezy zalité v lidském parafínu |
| CV | ≤5,0 % |
| Úroveň hádanky | a) Reakční pufry K-ras A a B dokáží stabilně detekovat 1% míru mutací v koncentraci 3 ng/μl divokého typu; b) Mutace 1×103Kopie/ml lze stabilně detekovat v prostředí divokého typu o koncentraci 1×10.5Kopie/ml, pokud je míra mutace 1 %; c) Při testování referenčního LoD SW3 od společnosti není k dispozici žádná hodnota Ct nebo je hodnota Ct = 0 reakčního pufru A a reakčního pufru B. |
| Použitelné nástroje | Systémy Applied Biosystems 7500 pro PCR v reálném čase, systémy Applied Biosystems 7300 pro PCR v reálném čase, systémy QuantStudio®5 pro PCR v reálném čase, systém LightCycler® 480 pro PCR v reálném čase, systém BioRad CFX96 pro PCR v reálném čase. |
Pracovní postup
Reagencie potřebná, ale není součástí dodávky:H2O bez DNáz/RNáz, bezvodý ethanol. Při testování vzorku tkáně zalitého v parafínu se doporučuje použít sadu QIAamp DNA FFPE Tissue Kit (56404) a sadu pro rychlou extrakci tkáňové DNA zalité v parafínu (DP330) od společnosti Tiangen Biotech (Beijing) Co., Ltd.
Spotřební materiál, který je potřeba, ale není součástí dodávky:Špičky bez DNázy/RNázy, jednorázové rukavice, centrifugační zkumavka bez DNázy/RNázy, stripy s 8 zkumavkami, centrifuga.







