Souprava pro detekci mutací lidského genu EGFR 29 (fluorescenční PCR) - RUO
Název produktu
Souprava pro detekci mutací lidského genu EGFR 29 (fluorescenční PCR) - RUO
Epidemiologie
Rakovina plic se stala hlavní příčinou úmrtí na rakovinu na celém světě a vážně ohrožuje lidské zdraví. Nemalobuněčný karcinom plic představuje přibližně 80–85 % pacientů s rakovinou plic. EGFR je v současnosti nejdůležitějším molekulárním cílem pro léčbu nemalobuněčného karcinomu plic. Fosforylace EGFR může podporovat růst, diferenciaci, invazi, metastázování nádorových buněk, antiapoptózu a podporovat angiogenezi nádoru. Inhibitory tyrozinkinázy EGFR (TKI) mohou blokovat signální dráhu EGFR inhibicí autofosforylace EGFR, čímž inhibují proliferaci a diferenciaci nádorových buněk, podporují apoptózu nádorových buněk, snižují angiogenezi nádoru atd., aby se dosáhlo cílené terapie proti nádoru [1]. Velké množství studií ukázalo, že terapeutická účinnost EGFR-TKI úzce souvisí se stavem mutace genu EGFR a může specificky inhibovat růst nádorových buněk s mutací genu EGFR [2,3]. Gen EGFR se nachází na krátkém raménku chromozomu 7 (7p12), má plnou délku 200 kB a skládá se z 28 exonů. Oblast mutace se nachází hlavně v exonech 18 až 21, deleční mutace kodonů 746 až 753 na exonu 19 představuje přibližně 45 % a mutace L858R na exonu 21 představuje přibližně 40 % až 45 % [4]. Pokyny NCCN pro diagnostiku a léčbu nemalobuněčného karcinomu plic jasně uvádějí, že před podáním EGFR-TKI je nutné provést testování mutace genu EGFR. Tato testovací sada se používá k podávání léků obsahujících inhibitory tyrozinkinázy receptoru epidermálního růstového faktoru (EGFR-TKI) a poskytuje základ pro personalizovanou medicínu pro pacienty s nemalobuněčným karcinomem plic. Tato sada se používá pouze k detekci běžných mutací v genu EGFR u pacientů s nemalobuněčným karcinomem plic. Výsledky testů slouží pouze pro klinickou informaci a neměly by být používány jako jediný základ pro individualizovanou léčbu pacientů. Lékaři by měli zvážit stav pacienta, indikace léků a léčbu. Reakce a další laboratorní ukazatele a další faktory se používají ke komplexnímu posouzení výsledků testů.
Kanál
| Reakční pufr | Kanál |
| Reakční pufr EGFR IC | Kanál FAM |
| Reakční pufr L858R | Kanál FAM |
| 19del reakční pufr | Kanál FAM |
| Reakční pufr T790M | Kanál FAM |
| Reakční pufr G719X | Kanál FAM |
| Reakční pufr 3Ins20 | Kanál FAM |
| Reakční pufr L861Q | Kanál FAM |
| Reakční pufr S768I | Kanál FAM |
Technické parametry
| Skladování | Kapalina: ≤ -18 ℃ Ve tmě |
| Trvanlivost | 12 měsíců |
| Typ vzorku | čerstvá nádorová tkáň, zmrazený patologický řez, patologická tkáň nebo řez zalitý v parafínu, plazma nebo sérum |
| CV | <5,0 % |
| Úroveň hádanky | detekce roztoku nukleové kyseliny v reakci na pozadí 3 ng/μL divokého typu dokáže stabilně detekovat 1% míru mutací; b) reakce nukleové kyseliny. Při 1% míře mutace lze stabilně detekovat mutaci 1×103 kopií/ml v prostředí divokého typu s koncentrací 1×105 kopií/ml; c) Interní referenční reakční roztok dokáže detekovat referenční produkt SW3 s nejnižším detekčním limitem podnikového interního referenčního roztoku. Pokud souprava detekuje referenční materiál s národním detekčním limitem, lze stabilně detekovat referenční materiál s detekčním limitem frekvence mutací 2,5 % a mutaci amplifikace genu EGFR s variací počtu kopií 4. |
| Specifičnost | Neexistuje žádná zkřížená reaktivita s divokým typem lidské genomové DNA a jinými mutantními typy. |
| Použitelné nástroje | Systémy Applied Biosystems 7500 pro PCR v reálném čase, Systémy Applied Biosystems 7300 pro PCR v reálném čase, Systémy QuantStudio® 5 pro PCR v reálném čase, Systém pro real-time PCR LightCycler® 480, Systém pro real-time PCR BioRad CFX96. |
Pracovní postup
Požadované, ale nedodané činidla:Voda bez DNázy/RNázy, bezvodý ethanol. Při testování vzorku tkáně zalitého v parafínu se doporučuje použít sadu QIAamp DNA FFPE Tissue Kit (56404) od společnosti QIAGEN a sadu Paraffin-embedded Tissue DNA Rapid Extraction Kit (DP330) od společnosti Tiangen Biotech (Beijing) Co., Ltd.. Při testování vzorku plazmy/séra se doporučuje použít sadu Macro & Micro-Test General DNA/RNA Kit (HWTS-3019-50, HWTS-3019-32, HWTS-3019-48, HWTS-3019-96) (kterou lze použít s automatickým extraktorem nukleových kyselin Macro & Micro-Test (HWTS-3006C, HWTS-3006B)) od společnosti Jiangsu Macro & Micro-Test Med-Tech Co., Ltd. nebo sadu QIAamp Circulating Nucleic Acid Kit (55114) od společnosti QIAGEN.
Spotřební materiál je vyžadován, ale není součástí dodávkyŠpičky bez DNázy/RNázy, jednorázové rukavice, centrifugační zkumavka bez DNázy/RNázy, stripy s 8 zkumavkami pro PCR, centrifuga.
